3D InSight™ ラット肝臓マイクロティッシュ

InSphero社が提供する3D InSight™ ラット肝臓マイクロティッシュのご紹介です。



3D InSight™ラット肝臓マイクロティッシュの特徴

  • 新鮮ラットプライマリ肝細胞とKupffer 細胞を含む非実質細胞の共培養によるマイクロティッシュ
  • 特異体質性薬物毒性(IDT)や反復投与試験による慢性毒性の評価に最適
  • 経済的かつ取扱い易い96 穴フォーマットでのお届け(384 穴フォーマットについては お問い合わせ 下さい)
  • 製造から2日以内にお届け

生体器官類似の細胞構成

PAS染色によるグリコーゲン貯蔵(下図左)および胆管ネットワーク(DPP-IV 発現で確認:緑に染色)の形成(下図右)が認められます。

(青:DAPI、赤: ICAM-1)

炎症反応の寄与により引き起こされる毒性に関する試験が実施可能

ラット肝臓マイクロティッシュをTrovafloxacin および炎症惹起物質(LPS)に暴露させた結果、マイクロティッシュ上清中にLDH の漏出が認められることから、この組み合わせが毒性を持つことがわかります。

高い再現性

ウェル間の直径のばらつきは5-7% 以下と、高い再現性を誇ります。

右に96穴GravityTRAP™ プレート中の3D InSight™ヒト肝臓マイクロティッシュの画像が提示されています。

3D InSight™ 肝臓マイクロティッシュの利用例

3D InSight™ ラット肝臓マイクロティッシュの仕様


表1. ラット肝臓マイクロティッシュの仕様
項目 内容
お届けフォーマット 96穴GravityTRAP™プレート(384穴に関してはお問い合わせ下さい)
プレートあたりマイクロティッシュ数 96個(ウェルあたり1個のマイクロティッシュ)
初期細胞数 肝細胞1000個
細胞の初期状態 新鮮プライマリ細胞(Sprague-Dawley)
作製期間 4日間
サイズ 220~320μm
サイズのばらつき(SD) 平均5~7%
お届け時のATP含量 5 pmol/個以上
培養用培地 3D InSight™ ラット肝臓マイクロティッシュメンテナンス培地、血清フリー
培地交換 2~3回/週
培養容量 50~70μL
お届け後の培養可能期間 3~4週間以上

3D InSight™ 肝臓マイクロティッシュで使用可能なエンドポイント


表2. 肝臓マイクロティッシュで使用可能なエンドポイント
毒性発現のメカニズム 細胞レベルの指標 エンドポイントアッセイの例
細胞毒性/肝毒性

ATP量

LDH(漏出/細胞内)

AST/ALT(漏出/細胞内)

α-GST(漏出/細胞内)

アルブミン分泌

尿素分泌

CellTiter-Glo® 3D(Promega)

CytoTox-One™ (Promega)

Fluitest® AST/ALT(Analytikon)

Albumin-ELISA(Bethyl Laboratories)

Urea-Assay (Biovision)

Kupffer細胞

IL-6分泌

TNF-α発現

IL-6 ELISA (Life Technologies)

TNF-α ELISA (Life Technologies)

ミトコンドリア障害

酸素消費量/細胞外酸性化

ミトコンドリア膜電位

XF-Flux(Seahorse Bioscience)

TMRMによるHCA (Life Technologies)

反応性代謝物細胞内 GSH量

GSH-Glo® (Promega)

MDAに対するIHC(脂質の過酸化の検出)

代謝能 シトクローム活性化/誘導

P450-Glo™ (Promega)

酵素活性

アポトーシス カスパーゼ3/7活性化

Caspase-Glo® 3/7 (Promega)

CellEvent (Life Technologies)によるHCA

脂肪症/リン脂質症 脂質の蓄積

HCS-LipidTOX™ (Life Technologies)

BODIPY (Life Technologies)

胆汁うっ滞

トランスポーター

胆汁分泌

BSEPに対するIHC

LC-MS分析

増殖 DNA合成 EdU Click-iT® (Life Technologies)

mRNAおよびタンパク質発現解析

トランスクリプトミクス

プロテオミクス

PCR Arrays (SA-Bioscience):M/p>

Affimetrix®アレイ

HRM-MS (Biognosys)

3D InSight™ ラット肝臓マイクロティッシュ製品リスト


表3. ラット肝臓マイクロティッシュ製品リスト
カタログ番号 内容
MT-02-001-01 プライマリ肝細胞由来3D InSight™ ラット肝臓マイクロティッシュ(96穴)
MT-02-001-04 プライマリ肝細胞および非実質細胞共培養3D InSight™ラット肝臓マイクロティッシュ(96穴)
CS-07-002-01* 3D InSight™ ラット肝臓メンテナンス培地、血清フリー (500mL)
CS-07-002-02* 3D InSight™ ラット肝臓メンテナンス培地、血清フリー (250mL)
トライアルセット
MT-02-001-01-TST2

ラット単独培養96穴 2枚セット

プライマリ肝細胞由来3D InSightTM ラット肝臓マイクロティッシュ(96穴)2枚

+ラット肝臓マイクロティッシュメンテナンス培地(250 mL)

MT-02-001-01-TST4

ラット単独培養96穴 4セット

プライマリ肝細胞由来3D InSightTM ラット肝臓マイクロティッシュ(96穴)4枚

+ラット肝臓マイクロティッシュメンテナンス培地(500 mL)

MT-02-001-01-TST6

ラット単独培養96穴 6枚セット

プライマリ肝細胞由来3D InSightTM ラット肝臓マイクロティッシュ(96穴)6枚

+ラット肝臓マイクロティッシュメンテナンス培地(500 mL)

共培養モデルトライアルセットのご提供に関しては お問い合わせ ください。

* 培地はマイクロティッシュと同時にのみご購入頂けます。