磁気ビーズは培養上清からの精製やプルダウン実験に最適です。
PureCube磁気ビーズはニッケルイオンを配位したキレートリガンド(IDAまたはNTA)を結合したアガロースビーズでコーティングされたフェリ磁性体です。
どちらのリガンド-金属システムもHisタグタンパク質を効果的に結合します。
✔ 25%サスペンションでお届け
✔ 70 mg/mLまでの結合能 (Ni-NTA)
✔ IDAおよびNTAリガンドのどちらも提供可能
✔ 抗Hisタグ抗体の別途ご提供も可能
実験室レベルから生産スケールまで一貫性を持って磁気ビーズの分離を行うために、Sepmag均一系バイオ磁気分離システムをお勧めします。
注: より高レベルでの発現や大スケールでの精製用にはPureCube Hisアフィニティアガロースをご使用になることをお勧めします。
ウェスタンブロットでのHisタグタンパク質検出用にタグ特異的抗体もご用意しております。
高い結合容量
IDA
PureCube
Ni-IDA磁気ビーズは1mLあたり40mgのタンパク質の結合が可能であり、他の競合製品と同等の結合能力を保持します。
図1. は大腸菌で発現した6-His Interleukin-betaをPureCube Ni-IDA
磁気ビーズおよび競合製品で精製したサンプルのSDS-PAGEの結果が示されております。同等の量のタンパク質が3つの溶出液から回収されていることがわかります。
NTA
PureCube Ni-NTA磁気ビーズは非常に高い結合容量を示します。
2社のマーケットリーダーから販売されている同等品とPureCube
Ni-NTA磁気ビーズで大腸菌発現GFPを精製する実験が別途実施されました。
図2.
はSDS-PAGEの結果を比較したものです。競合Gを用いて4つの溶出フラクションから回収された総タンパク質量は競合Qより多く、PureCube
Ni-NTA磁気ビーズを用いて4つの溶出フラクションから回収された総タンパク質(Cube,
E1-E4)は競合G製品と比較してさらに46%も多いことが確認されました。
IDAとNTAの比較
図3. に示される様に、iminodiacetic acid (IDA)およびnitrilotriacetic acid (NTA)キレートリガンドはニッケルとHisタグのイミダゾール環の間と類似した相互作用をサポートします。
これらのリガンド間ではまず、サイズが異なります。IDAは小さく、高密度にレジンに結合し、高い結合能を誇ります。
一方、IDAの配位数はNTAより少数です(オレンジ)。
結果として、IDAレジンからは金属イオンが溶離しやすく、NTAと比較して溶離タンパク質の純度は低くなります。
Ni/Co配位磁気ビーズのリスト(大容量にも対応可能です)
表1. Ni/Co配位磁気ビーズのリスト
カタログ番号 |
製品名と内容 |
Ni-NTA磁気ビーズ |
|
31201 |
PureCube Ni-NTA Magbeads (1 mL) 1 mL 25% suspension |
31205 |
PureCube Ni-NTA Magbeads (5 ml) 5 mL 25% suspension |
31225 |
PureCube Ni-NTA Magbeads (25 mL) 25 mL 25% suspension |
31290 |
PureCube Ni-NTA Magbeads (4 * 25 ml) 4 * 25 mL 25% suspension |
Co-NTA磁気ビーズ |
|
31501 |
PureCube Co-NTA Magbeads (1 mL) 1 mL 25% suspension |
31505 |
PureCube Co-NTA Magbeads (5 ml) 5 mL 25% suspension |
31525 |
PureCube Co-NTA Magbeads (25 mL) 25 mL 25% suspension |
31590 |
PureCube Co-NTA Magbeads (4 * 25 ml) 4 * 25 mL 25% suspension |
無配位NTA磁気ビーズ |
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31801 |
PureCube NTA Magbeads (1 mL) 1 mL 25% suspension |
31805 |
PureCube NTA Magbeads (5 ml) 5 mL 25% suspension |
31825 |
PureCube NTA Magbeads (25 mL) 25 mL 25% suspension |
31890 |
PureCube NTA Magbeads (4 * 25 ml) 4 * 25 mL 25% suspension |
Ni-IDA磁気ビーズ |
|
30201 |
PureCube Ni-IDA Magbeads (1 mL) 1 mL 25% suspension |
30205 |
PureCube Ni-IDA Magbeads (5 ml) 5 mL 25% suspension |
30225 |
PureCube Ni-IDA Magbeads (25 mL) 25 mL 25% suspension |
30290 |
PureCube Ni-IDA Magbeads (4 * 25 ml) 4 * 25 mL 25% suspension |
Co-IDA磁気ビーズ |
|
30501 |
PureCube Co-IDA Magbeads (1 mL) 1 mL 25% suspension |
30505 |
PureCube Co-IDA Magbeads (5 ml) 5 mL 25% suspension |
30525 |
PureCube Co-IDA Magbeads (25 mL) 25 mL 25% suspension |
30590 |
PureCube Co-IDA Magbeads (4 * 25 ml) 4 * 25 mL 25% suspension |
無配位IDA磁気ビーズ |
|
30801 |
PureCube IDA Magbeads (1 mL) 1 mL 25% suspension |
30805 |
PureCube IDA Magbeads (5 ml) 5 mL 25% suspension |
30825 |
PureCube IDA Magbeads (25 mL) 25 mL 25% suspension |
30890 |
PureCube IDA Magbeads (4 * 25 ml) 4 * 25 mL 25% suspension |
抗Hisタグ抗体 |
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40040 |
PentaHis Antibody* (0.1 mg) BSA-free lyophilized * manufactured by QIAGEN |