その他の基質

Iris Biotech社よりご提供可能なその他の酵素基質のご紹介です。ルシフェリン、セレンテラジン、デカルボキシラーゼ基質、ジヨードチロシントランスアミナーゼ基質を掲載しております。



ルシフェリン

自然界ではアメリカホタル(photinus pyralis)が、子孫を残すパートナーを見つけるために、ルシフェラーゼの生物発光を用いています。

ルシフェラーゼ反応の結果560 nmでの黄緑色発光が生じます。

この反応には、酵素であるルシフェラーゼ、基質D-ルシフェリン、補因子ATPおよびMg2+と酸素を必要とします。

反応はいくつかのステップがカスケード状に起こることで成立します。

最初にルシフェリンのアデニル化が起こり、引き続いてオキシルシフェリンへの酸化が連続で起こります。

この反応から得られたオキシルシフェリンは、電子的に励起された状態にあります。

基底状態に戻る際に光子が解放され、低pHで赤(620nm)、中性pHで黄~緑色(550nm)を示します。

図1.
ルシフェラーゼの生物発光

現代のバイオテクノロジーにおいて、このルシフェラーゼの応用は多岐に渡ります。

▶ 食品工業:食品の表面における微生物汚染の有無を明確にするルシフェラーゼ試験[1]

▶ lucレポーター遺伝子システム: 遺伝子発現を検出可能な、非常に感度の高い手法(右写真)[2]

▶ タンパク質-タンパク質相互作用の検出

▶ 細胞受容体活性の測定

▶ 腫瘍成長のモニタリング [3]

D-ルシフェリンおよびD-ルシフェリンの水溶性カリウム塩はルシフェラーゼの基質として入手可能です。

L-ルシフェリンのカリウム塩は、ホタルルシフェラーゼの阻害剤であり、ルシフェリル-CoAシンテターゼの基質です。

表1. ルシフェリン関連製品

参考文献

セレンテラジン

ルシフェラーゼはホタルのみではなく、多くの他の生物の体内中にも存在します。

別のルシフェラーゼグループはCoelenterata(腔腸動物)で最初に発見されたため、セレンテラジン(Coelenterazine)と名づけられました。

セレンテラジンは細胞透過性をもち、例えばイクオリン(Aequorin)、オベリン(Obelin)、Rluc(Renilla reniforms luciferase)、Gluc(Gausseria luciferase)など、多くの水生生物の発光タンパク質の基質になります。

セレンテラジンに似た物質であるセレンテラジンhのような分子を利用する生物も存在します。

セレンテラジンは酸素の存在下、発光タンパク質と反応しセレンテラミド(Coelenteramid)と二酸化炭素、および465 nmの波長の光子を放出します。

また、アポイクオリン(Apoaequorin)のcDNAで形質転換された細胞中において、細胞内のCa2+濃度の変化を検出するために使用することも可能です。セレンテラジンはまた強力な抗酸化剤としても機能します。

表2. セレンテラジン関連製品

天然のセレンテラジンと比較して、セレンテラジンhは16倍、セレンテラジンHCPは190倍ほどの高い発光強度を有します。

さらに、セレンテラジンHCPは応答時間が速いのが特徴です。

他のセレンテラジン誘導体の用意もございます。お気軽にお問い合わせください。

参考文献

デカルボキシラーゼ基質

表3. デカルボキシラーゼ基質関連製品

インドールの形成は、吸光度をモニタリングすることで検出が可能です。

これらの化合物は、芳香族酸に作用するジオキシゲナーゼをコードする遺伝子をクローニングする際にその発色基質として使用されます。

p-クミン酸分解菌株Pseudomonas putida F1とm-及びp-トルイル酸分解株Pseudomonas putida MT-2は、インドール-2-カルボン酸およびインドール-3-カルボン酸を色素として知られるインディゴ(Indigo)、インジルビン(Indirubin)、及びイサチン(Isatin)に変換します。

ジオキシゲナーゼは、この反応の第一段階を触媒すると考えられています。

またインドール-2-カルボン酸は、NMDA受容体へのグリシンによるグルタミン酸刺激増強の競合的アンタゴニストでもあります。

参考文献

ジヨードチロシントランスアミナーゼ基質

表4. ジヨードチロシントランスアミナーゼ基質関連製品リスト

ジヨードチロシントランスアミナーゼと甲状腺ホルモンのアミノトランスフェラーゼの基質です。

生合成および甲状腺ホルモンの代謝の代替経路の中間体でもあります。

参考文献

title=“表1. ルシフェリン関連製品”

title=“表2. セレンテラジン関連製品”

title=“表3. デカルボキシラーゼ基質関連製品”

title=“表4. ジヨードチロシントランスアミナーゼ基質関連製品リスト”


コード 製品名 分子式 CAS 分子量 内容量 名称
LS-1205.0250 D-Luciferin C11H8N2O3S2 2591-17-5 280.33 250mg ((S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid, Firefly (synthetic), 99%
LS-1205.1000 D-Luciferin C11H8N2O3S2 2591-17-5 280.33 1g ((S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid, Firefly (synthetic), 99%
LS-1206.0250 D-Luciferin*K C11H7N2O3S2K 115144-35-9 318.42 250mg (S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid, Firefly, potassium salt
LS-1206.1000 D-Luciferin*K C11H7N2O3S2K 115144-35-9 318.42 1g (S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid, Firefly, potassium salt
LS-1207.0025 L-Luciferin*K C11H7N2O3S2K - 318.42 25mg (L)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid, Firefly, potassium salt

コード 製品名 分子式 CAS 分子量 内容量 名称
LS-3365.0010 Coelenterazine 400a C26H21N3O 70217-82-2 391.48 10mg 2,8-Dibenzyl-6-phenyl-imidazo[1,2a]pyrazin-3-(7H)-one
LS-3365.0025 Coelenterazine 400a C26H21N3O 70217-82-2 391.48 25mg 2,8-Dibenzyl-6-phenyl-imidazo[1,2a]pyrazin-3-(7H)-one
LS-3365.0100 Coelenterazine 400a C26H21N3O 70217-82-2 391.48 100mg 2,8-Dibenzyl-6-phenyl-imidazo[1,2a]pyrazin-3-(7H)-one
LS-3370.0010 Coelenterazine e C28H23N3O3 114496-02-5 449.5 10mg 12-Benzyl-8-hydroxy-2-(4-hydroxybenzyl)-5,6-dihydrobenzo[f]imidazo[1,2-a]quinoxalin-3(11H)-one
LS-3370.0025 Coelenterazine e C28H23N3O3 114496-02-5 449.5 25mg 12-Benzyl-8-hydroxy-2-(4-hydroxybenzyl)-5,6-dihydrobenzo[f]imidazo[1,2-a]quinoxalin-3(11H)-one
LS-3375.0000 Coelenterazine h C26H21N3O2 50909-86-9 407.48 0 2,8-Dibenzyl-6-(p-hydroxyphenyl)-imidazo[1,2a]pyrazin-3-(7H)-one
LS-3380.0000 Coelenterazine hcp C25H25N3O2 123437-32-1 399.48 0 2-Benzyl-8-(cyclopentylmethyl)-6-(4-hydroxyphenyl)imidazo[1,2-a]pyrazin-3(7H)-one
LS-3385.0001 Coelenterazine, native C26H21N3O3 55779-48-1 423.46 1mg 2-(p-Hydroxybenzyl)-6-(p-hydroxyphenyl)-8-benzyl-imidazo[1,2-a]pyrazin-3-(7H)-one
LS-3385.0010 Coelenterazine, native C26H21N3O3 55779-48-1 423.46 10mg 2-(p-Hydroxybenzyl)-6-(p-hydroxyphenyl)-8-benzyl-imidazo[1,2-a]pyrazin-3-(7H)-one
LS-3385.9025 Coelenterazine, native C26H21N3O3 55779-48-1 423.46 25mg 2-(p-Hydroxybenzyl)-6-(p-hydroxyphenyl)-8-benzyl-imidazo[1,2-a]pyrazin-3-(7H)-one

コード 製品名 分子式 CAS 分子量 内容量 名称
HAA8350.0500 ICA C9H7NO2 1477-50-5 161.16 500g Indole-2-carboxylic acid, 99%
HAA8350.1000 ICA C9H7NO2 1477-50-5 161.16 1kg Indole-2-carboxylic acid, 99%
HAA8350.5000 ICA C9H7NO2 1477-50-5 161.16 5kg Indole-2-carboxylic acid, 99%
HAA8370.0010 Indole-3-carboxylic acid, 99% C9H7NO2 771-50-6 161.16 10g Indole-3-carboxylic acid, 99%

コード 製品名 分子式 CAS 分子量 内容量 名称
HAA7780.0100 H-L-Tyr(3,5-I2)-OH C9H9I2NO3 300-39-0 432.98 100g 3,5-Diiodo-L-tyrosine dihydrate
HAA7780.0250 H-L-Tyr(3,5-I2)-OH C9H9I2NO3 300-39-0 432.98 250g 3,5-Diiodo-L-tyrosine dihydrate
HAA7780.1000 H-L-Tyr(3,5-I2)-OH C9H9I2NO3 300-39-0 432.98 1kg 3,5-Diiodo-L-tyrosine dihydrate

[1] Hawronskyj, J.-M. und Holah, J., ATP: a universal hygiene monitor. Trends Food Sci. Tech. 1997; 8: 79-84.

[2] Dussmann, P. et al., Live in vivo imaging of Egr-1 promoter activity during neonatal development, liver regeneration and wound healing. BMC Dev. Biol. 2011; 11: 28.

[3] O’Connell-Rodwell, CE. et al., In vivo analysis of heat-shock-protein-70 induction following pulsed laser irradiation in a transgenicreporter mouse. J. Biomed. Opt. 2008; 13(3): 030501.

▷ Nakajima-Shimada, J. et al., Monitoring of intracellular calcium in Saccharomyces cerevisiae with an apoaequorin cDNA expression system. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1991; 88: 6878-6882.

▷ Rizzuto, R. et al., Rapid changes of mitochondrial Ca2+ revealed by specifically targeted recombinant aequorin. Nature 1992; 358: 325-327.

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▷ Sheu, Y.-A. et al., Measurement of intracellular calcium using bioluminescent aequorin expressed in human cells. Anal. Biochem. 1993; 209: 343-347.

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